B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞是一株小鼠黑素瘤細(xì)胞。細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣。B16系列細(xì)胞,使用DMEM培養(yǎng)時(shí)可能出現(xiàn)黑色素快速積累,細(xì)胞不增殖或死亡的情況,若您需要分泌黑色素相關(guān)實(shí)驗(yàn)可更換為DMEM培養(yǎng)。
產(chǎn)品分類
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B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞
簡(jiǎn)稱:B16
中文名:小鼠黑色素瘤細(xì)胞
種屬:小鼠
來(lái)源:黑色素瘤;雄性;C57BL/6
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟:
1. 吸走多余培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞;
2. 吸干凈PBS后
加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒(méi)細(xì)胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;
(細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感,消化過(guò)度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(zhǎng)。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時(shí)即可終止,禁止消化到細(xì)胞*漂浮?;靹蚣?xì)胞時(shí)盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細(xì)胞混勻;
4. 將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);
傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定,大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。
Cell cryopreservation
1.凍存液:92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過(guò)夜后液氮保存。
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